细胞分析平台


循环肿瘤细胞分析平台

循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)是指从实体瘤中脱离出来并进入外周血液循环的肿瘤细胞,最早由Aust Med J Ashworth等在转移性癌症患者血液中观察到。

近年来随着方法学研究的发展,CTC已被证实存在于肺癌、乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、膀胱癌和卵巢癌等多种恶性肿瘤患者的血液中,并且与患者的临床分期、无进展生存期、总生存期、药物疗效以及早期复发和转移均密切相关。因此,CTC检测以一种新型的“液体活检”方式在肿瘤早期筛查、治疗过程实时监控、预后评估、癌症复发预测、耐药分析、辅助诊断等临床过程有重要应用。可见,CTC检测不仅弥补了现有临床肿瘤诊断方法的不足,而且为临床提供了从肿瘤细胞水平到分子水平的分析平台,为个体化治疗提供参考。鉴于CTC检测在临床中的重要意义,本公司开展了iFISH-CTC和CellSearch两个技术平台对CTC进行检测。

iFISH-CTC与Cell Search检测临床及科研应用意义

(1)根据CTC数值对患者无进展生存期(PFS)和总体生存期(OS)的研究

 无论是治疗前还是治疗后,循环肿瘤细胞CTC数量均是强有力的独立预测因子。临床研究证实:当血样中的循环肿瘤细胞高于阈值(cut-off)时提示预后不好,当样本中循环肿瘤细胞低于阈值(cut-off)提示预后良好。

(2)评价患者疗效、帮助医生制定个体化治疗方案

CTC作为独立的预后因子能及时反映治疗过程中患者的状况变化, CTC数量升高提示疗效不好而数量降低提示疗效较好。这种实时、灵敏、可靠的方法能够帮助医生正确判断疗效和制定高效的个体化治疗方案。

(3)比影像学及其他生物标志物更早、更准确、更灵敏地判断疗效和预后

CTC检测比传统的影像学更早、更准确、更灵敏地判断预后。大量研究表明:治疗4周后监测CTC对于预后判断的结果与传统影像学在治疗12周后的判断结果极其吻合;而且,当CTC数值大于等于阈值(cut-off)时,CTC检测对于预后判断比影像学更准确。

CTC检测比单独的生物学标记物更好地判断疗效和预后。研究表明:在前列腺癌中,CTC检测对于预后的判断比传统的标记物PSA更准确和灵敏。

(4)在肿瘤的早期诊断中具有重要的意义

肿瘤患者出现临床症状的时候,一般都已经进展到比较晚期了,而CTC技术可以在肿瘤出现较早期的时候进行筛查和诊断,实现对肿瘤的早期干预治疗和预防的目的。

(5)对疾病进展实时监控

通过对治疗前后的CTC测定,可实现对治疗效果的实时监控以及有效评估,同时还可以实时监控肿瘤药物耐药性的发生。除此之外,通过对患者体内CTC数目的检测,还能够预测病人的生存期。

(6)循环肿瘤细胞单细胞测序

对于晚期或非手术患者难以获得足够的组织样本、无法实时监测而制约了靶向治疗药物的使用,CTC作为最能反映肿瘤进展信息的替代标本来源,可实现实时监测肿瘤基因表达/突变。

通过对单个CTC测序技术,可以发现存在差异性基因表达模式,鉴定新的CTC候选生物标记物。此外,通过对CTC进行全外显子和全基因组测序,并对细胞拷贝数变化进行检测,可以监控肿瘤转移。对不同病人的单个CTC谱进行分析,可以鉴定癌症病理亚型的差异模式,有希望利用CTC的CNV进行分类。

FISH平台

1、临床和科研应用方向:

a.在肿瘤疾病分型诊断领域的应用

应用范围主要有:提前预防及治疗病患、辅助临床医疗诊断、对肿瘤确诊病人评估预后及中位生存期、指导用药及治疗方案等。

b.在白血病分型诊断领域的应用

白血病与染色体上特定片断的缺失、易位和重排有关。不同类型的白血病病发机理和治疗方案不尽相同。因此准确地对上述白血病进 行分型诊断对于制定相应的治疗方案至关重要。目前白血病领域的主要诊断手段就是荧光原位杂交技术。

2、技术参数

1)特异性高,探针长度在1KB-4MB间,FISH探针能特异性地识别特定的基因或染色体上特定的片断。

2)稳定性好,经受原位杂交的处理而不变性。一次标记后可在两年内使用。

3)灵敏度高,可定位长度在1kb的DNA序列。

4)客观,荧光原位杂交结果的判定借助于对荧光的颜色判断和信号计数,客观地量化了检测地结果。

5)可重复性好。

核型分析平台

1.临床和科研应用方向:

a)染色体异常的检出有利于血液病的诊断和鉴别诊断。

b)染色体核型分析的检测可以用来监测白血病的缓解和复发。

c)染色体作为独立的预后指标有助于治疗方案的选择。

d)染色体制备后应用染色体荧光原位杂交技术来提高常规核型分析的敏感性、准确性和可靠性。

2.技术参数:

成本低,通量大:可宏观上分析46条染色体的一条或未知的染色体变异

分辨率低:只能检测5-10Mb以上的大片段缺失或重复


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